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細胞培養(yǎng)
一、項目介紹
細胞 (cell)是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位，已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成，因此，對細胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。以細胞為研究對象，從細胞的整體水平、亞顯微水平、分子水平等三個層次，研究細胞和細胞器的結(jié)構(gòu)和功能、細胞的生活史和各種生命活動規(guī)律頗具意義。
二、樣品保存運輸（寄送細胞時請下載資料中心樣品寄送信息單《細胞送樣單》并填寫好發(fā)送給平臺助理）
1、活細胞運輸方法
請用如圖所示不透氣培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞， 待細胞匯合度達到70% 左右時，灌滿新鮮培養(yǎng)基至接近瓶口處，擰緊瓶蓋，封口膜進一步封住瓶口。瓶身上做好標記(細胞名稱，培養(yǎng)基，日期等)。打包時必需做防震處理。常溫寄送。
2、凍存細胞運輸方法
一定要保證干冰充足(2-3天寄送時間，8-10kg干冰較充足)，凍存管確保被干冰完全覆蓋。切勿凍融。勿將水冰混入干冰件中。
3、流式樣本接收注意事項
①細胞凋亡
需要活細胞(外地樣本不接)。如果細胞帶熒光，一定要在交接單和培養(yǎng)板上備注，否則按照無熒光處理。如果因此導(dǎo)致檢測結(jié)果不可用及樣本浪費，我方概不負責，也不接受退單。
②細胞周期
周期需要細胞量比較多，6 孔板送樣要求匯合度在70%以上，但不能超過90%。外地樣品，需用預(yù)冷的70% 乙醇固定過夜后（貼壁細胞需要消化后進行固定），離心棄固定液，加1ml PBS重懸，封口膜封好，4℃運輸寄到實驗室。
③流式JC-1
需要活細胞(外地樣本不接)。細胞匯合度高于70%(6 孔板)，多提供2 個空白孔，做陰性和陽性對照。如果細胞帶紅光或綠光，不能檢測。
④流式ROS
需要活細胞(外地樣本不接)。細胞匯合度高于70%(6 孔板)，多提供2 個空白孔，做陰性和陽性對照。如果細胞帶綠光，不能檢測。
⑤細胞表抗
提前確定公司是否有相應(yīng)流式抗體(組化抗體不可用)，其他抗體需要客戶自己提供(外地樣本不接)。
⑥流式三標
提前告知樣本具體數(shù)量和類型(血液或脾臟~)。血樣用抗凝管收集(胞內(nèi)染色至少需要1.5 mL，表抗需要約1 ml)，注意防止凝血，4℃保存運輸。血樣4℃保存最多只能存放一周，時間越久實驗結(jié)果越差。取血后，需盡快寄到實驗室;取脾臟時盡量將動物帶到實驗室，直接在實驗室取材后開始實驗，若不能將動物帶到實驗室，取材(整個脾臟)后將組織放在含有PBS 的EP 管或離心管中，4℃保存，提細胞必須在取材后6 小時以內(nèi)完成，注意有些檢測指標(Treg,TH1, TH2 等)需無菌提取。外地樣本不接。
4、質(zhì)粒、RNA類、病毒類
質(zhì)粒載體、miRNA、siRNA等-20℃寄送。
慢病毒：-80℃保存、 充足純干冰寄送。